应用反转录PCR和实时荧光定量PCR技术判定现场物证生物属性

• 作者: 刘亚楠 周怀谷 平原 张晨 徐庆文 许炎 邹凯南 黄江平
• 来源期刊: 法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医遗传学 反转录PCR 实时荧光定量PCR 血液 唾液 精液
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 259-262
• 页数: 4页
• 分类号: DF795.2
• 字数: 3407字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5619.2013.04.006

摘要

目的 探寻分子生物学方法判定刑事案件现场物证的生物属性的可行性. 方法 取30份现场生物检材,其中血液(斑)、唾液(斑)、精液(斑)各10份,分别进行常规检验法和分子生物学方法,通过DNA-RNA共提取技术,将其中的mRNA运用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术反转录成cDNA,根据3种生物检材不同的目标基因设计3对特异性引物,进行实时荧光定量PCR扩增,通过熔解曲线测定不同的熔解温度(Tm)和不同长度的扩增片段来区分生物检材. 结果 血液(斑)的Tm值为(84.5±0.2)℃,片段长度177 bp;唾液(斑)的Tm值为(76.9±0.3)℃,片段长度134 bp;精液(斑)的Tm值为(88.5±0.2)℃,片段长度294 bp. 结论 与常规检验法比较,联合应用RT-PCR和实时荧光定量PCR技术判定检材的生物属性特异性强、灵敏度高、结果稳定可靠,可应用于日常法医物证检验.