rAAV2／1载体介导 EGFP 对大鼠骶髓转染的实验研究

• 作者: 徐美玲 胡映秋
• 来源期刊: 生物医学工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺相关病毒 增强型绿色荧光蛋白 骶髓 转染 基因治疗
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 239-242
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 3106字
• 语种: 中文

摘要

以重组腺相关病毒载体（recombinant adeno -associated virus，rAAV）携带增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）基因转染入大鼠骶髓，观察其定位及表达情况，评价其作为骶髓病变基因治疗载体的可行性。SD 大鼠经膀胱肌层多点注射 rAAV2/1-EGFP，分别按转染复数1×109、1×1010、4×1010转染。分别在2周、4周、8周后，将大鼠深麻醉，经左心室-升主动脉插管4％多聚甲醛灌注固定，慢慢剥离出脊髓，将脊髓放入含30％蔗糖的 PBS 中过夜（4℃），然后恒温冰冻切片机内连续切片，厚度12μm，免疫荧光染色（GFP 抗体，FITC 标记山羊抗兔 IgG）后，在荧光显微镜下观察 EGFP 表达情况。荧光显微镜下显示，4周时，转染复数为4×1010的大鼠骶髓神经元表达强荧光，可见增强型绿色荧光蛋白弥散表达。rAAV2/1载体可将 EGFP 基因有效地转染入大鼠骶髓，rAAV2/1载体是一种理想的基因治疗载体，为rAAV2/1作为载体转染骶髓治疗神经源性疾病提供理论依据。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡映秋		11	56	4.0	7.0
2	徐美玲		5	27	2.0	5.0