rAAV1-EGFP和rAAV2-EGFP转染犬骨髓间充质干细胞的比较

• 作者: 刘斌 戎利民 曾春 王昆 蔡道章 谢沛根
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 腺相关病毒 增强绿色荧光蛋白 组织工程 犬
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 717-722
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 字数: 4371字
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究不同血清型腺相关病毒(rAAV)载体介导的增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)对体外培养犬骨髓间充质十细胞(MSC)的转染效率及其毒性作用.[方法]应用密度梯度离心法及贴壁筛选法分离培养犬MSC,倒置显微镜及Giemsa染色观察细胞形态.透射电镜观察其超微结构,流式细胞仪鉴定其表面标记物.取第3代MSC,以MOI为10~4～10~5v.g/cell 的rAAV1-EGFP和rAAV2-EGFP进行转染,3、7、21 d后荧光显微镜观察检测转染效率;MTT法检测rAAV1-EGFP和rAAV2-EGFP对MSC的毒性作用.[结果]原代及传代培养的MSC呈梭形外观,具有较强的增殖能力.MSC超微结构显示其胞体较小,细胞核/浆比例大,胞浆少,染色质较疏松.细胞表面抗原CD29、CD44表达阳性,CD34表达阴性.随MOI的增加及时间的延长,rAAV1-EGFP、rAAV2-EGFP对犬MSC的转染效率逐渐增加,rAAV2-EGFP转染效率明显高于rAAV1-EGFP(P<0.01).转染MSC细胞后,细胞生长正常,MTT法显示各转染组与未转染组的光密度值无统计学差异(P>0.05).[结论]相对犬MSC.rAAV2是一种比rAAV1更优越的转基凶载体,而且对细胞生长无明显抑制,作为组织工程种子细胞的载体是安全可行的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘斌	中山大学附属第三医院骨科	122	778	16.0	21.0
2	蔡道章	中山大学附属第三医院骨科	161	1403	20.0	27.0
3	曾春	中山大学附属第三医院骨科	70	663	15.0	21.0
4	王昆	中山大学附属第三医院骨科	78	717	15.0	23.0
5	戎利民	中山大学附属第三医院骨科	93	535	11.0	19.0
6	谢沛根	中山大学附属第三医院骨科	26	169	8.0	12.0