中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂对U937细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 刘北忠 张曦 朱丹 朱新瑜 王慧 胡秀秀 钟梁 马鹏鹏 高远梅
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 关键词: 弹性蛋白酶抑制剂 U937细胞 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 507-511
• 页数: 5页
• 字数: 3888字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2013.06.011

摘要

目的 比较两种中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)抑制剂GW311616A和西维来司钠(sivelestat)对U937细胞增殖和调亡的影响.方法 采用四唑蓝比色试验(MTT)检测细胞增殖抑制率；用透射电镜观察细胞形态学变化；用流式细胞术检测细胞凋亡[膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)双标记法]及细胞周期变化；应用间接免疫荧光法观察细胞内NE表达水平；同时利用ELISA法和比色法检测细胞内NE含量和活性的变化.使用SPSS13.0软件对所得数据进行统计分析,采用完全随机设计资料的方差分析和Dunnett-t检验对各处理组数据进行比较.结果 MTT法检测结果显示两种药物均能抑制U937细胞的增殖,且具有一定的剂量依赖效应,GW311616A和西维来司钠的IC50值分别为150、214 μmol/L.GW311616A对U937细胞的增殖抑制作用高于西维来司钠(P＜0.01)；电镜结果显示两种药物处理的U937细胞均能看到典型的细胞凋亡形态；Annexin V/PI双标记法结果表明两种药物均能引起U937细胞的早期凋亡,GW311616A(150 μmol/L)组的凋亡率为13.60％,西维来司钠组(150 μmol/L)为3.69％,GW311616A对其凋亡的影响比西维来司钠更明显(P＜0.01)；流式细胞术检测结果显示GW311616A(150 μmol/L)组的凋亡率为14.61％,细胞周期主要阻滞于G2/M期,西维来司钠(150 μmol/L)组的凋亡率为4.25％,细胞周期主要阻滞于S期；间接免疫荧光法检测结果显示GW311616A组荧光强度明显减弱,而西维来司钠组荧光强度未明显减弱；ELISA和比色法结果显示两种药物均能使U937细胞内NE含量和活性降低,但GW311616A对他们的影响大于西维来司钠(P＜0.01).结论 GW311616A和西维来司钠均能抑制U937细胞的增殖,引起其凋亡,但前者比后者更有效,更能造成细胞的损伤.