小桐子磷脂二酰甘油酰基转移酶(JcPDATl)cDNA的克隆与功能鉴定

• 作者: 刘爱忠 徐荣华 王如玲 田波 邱丽俊 阳天泉
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小桐子 PDAT 简并PCR 基因克隆 荧光定量PCR 酵母互补实验
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 123-130
• 页数: 8页
• 分类号: Q786|S565.903
• 字数: 6896字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7505/j.issn.1007-9084.2013.02.003

摘要

使用简并PCR结合RACE技术从能源植物小桐子种子中克隆了一个PDAT基因的cDNA全长,命名为JcPDAT1(GenBank登陆号为HQ827796).JcPDA T1全长2 869bp,包含一个长为2 013bp的开放阅读框,编码670个氨基酸.多序列比对和进化分析表明该基因编码蛋白与其他植物PDAT高度同源,具有典型的PDAT结构域.Realtime PCR结果表明JcPDAT1在种子、叶和根里面都有表达,且在种子发育过程中大量表达.酵母互补实验证实该基因编码蛋白具有PDAT酶活性.在与酿酒酵母突变体H1246α的互补实验中发现,TLC层析(薄层层析法)和尼罗红染色结果都显示JcPDAT1的表达使H1246α恢复合成TAG,说明JcPDAT1具有PDAT的功能活性.