重组抗菌肽 Cecropin P1在毕赤酵母 X-33中的表达以及纯化后的生物活性分析

• 作者: 刘德辉 唐丽云 焦茂兴 郑红玉 郭春和 项林盛 黄毓茂
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 抗菌肽 表达 纯化 生物活性
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学与兽医学
• 页码范围: 569-573
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 4721字
• 语种: 中文

摘要

为了在毕赤酵母Pichia pastoris表达系统中表达猪源Cecropin P1并分析其生物活性，根据Cecropin P1的氨基酸序列和毕赤酵母的密码子偏嗜性设计引物，通过SOEing法合成全基因片段载入到PpicZαA质粒中，酶切线性化重组质粒PpicZαA-cecropin P1后电穿孔导入毕赤酵母X-33中进行整合，经Zection筛选和PCR检测获得高拷贝的转化子。发酵表达后将表达产物经加热预处理和Sephadex G-25层析及冻干浓缩后，Tricine-SDS-PAGE显示明亮单一条带。采用琼脂扩散法对纯化后的抗菌肽的热稳定性、酸碱稳定性、耐胰酶和胃蛋白酶稳定性进行了生物活性分析，结果表明Cecropin P1具有较强的热稳定性、酸稳定性及胃蛋白酶稳定性，但是在碱性环境下和胰酶作用下抑菌活性明显下降。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄毓茂	华南农业大学兽医学院	72	520	12.0	20.0
2	焦茂兴		23	82	4.0	8.0
3	刘德辉		3	14	1.0	3.0
4	唐丽云	华南农业大学兽医学院	7	33	2.0	5.0
5	项林盛	华南农业大学兽医学院	6	33	2.0	5.0
6	郑红玉	华南农业大学兽医学院	5	3	1.0	1.0
7	郭春和	中山大学生命科学学院	4	3	1.0	1.0