甘蓝型油菜RabGDI3基因启动子的克隆和功能验证

• 作者: 于景印 刘胜毅 李振波 王轩鹏 童超波 董彩华 黄军艳
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 油菜 启动子 RabGDI3 花药 转基因拟南芥
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 109-116
• 页数: 8页
• 分类号: S565.403
• 字数: 6607字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7505/j.issn.1007-9084.2013.02.001

摘要

以甘蓝型油菜(Brassica napus L.)基因组DNA为模板扩增获得BnRabGDI3基因翻译起始位点上游2 064bp的启动子序列.在线预测分析发现该启动子序列中有很多花药特异表达元件.将克隆得到的BnRabGDI3启动子取代pBI121中的CaMV35S启动子,构建BnRabGDI3启动子驱动报告基因gus表达的双元载体pBnRabG-DI3::GUS,并用根癌农杆菌介导法转化拟南芥.对获得的含有报告基因gus的6个转基因株系进行GUS活性分析.结果表明,在BnRabGDI3启动子的驱动下,报告基因gus仅在花药中特异表达.花药的冰冻切片显示gus仅在花药发育的第11到13期有表达,在花药的双核和三核期小孢子细胞中表达量最高.实验结果暗示BnRabGDI3基因可能与小孢子的发育相关.