pEGFP-C3/Smad3真核表达质粒的构建及在MCF-7乳腺癌细胞中的转染

• 作者: 刘明 白明瀚 陈洪生
• 来源期刊: 实用肿瘤学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: EGFP Smad3 真核表达载体 MCF-7乳腺癌细胞
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-10
• 页数: 5页
• 分类号: R73-34
• 字数: 3958字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-3070.2013.01.002

摘要

目的 构建pEGFP-C3/Smad3真核表达质粒,并进行鉴定.为进一步研究Smad3在抑制乳腺癌生长机制中起到的作用提供实验基础.方法 利用RT-PCR方法从MCF-7乳腺癌细胞中获得cDNA,应用PCR方法扩增、提取 Smad3的基因片段,酶切后与pEGFP-C3真核表达载体连接,构建pEGFP-C3/Smad3真核表达质粒,进行测序、酶切鉴定,表明质粒构建成功.将构建的质粒瞬时转染至MCF-7乳腺癌细胞中,通过荧光倒置显微镜观察、RT-PCR技术及Westen blot技术鉴定转染是否成功.结果本实验成功构建了pEGFP-C3/Smad3真核表达质粒.结论 pEGFP-C3/Smad3真核表达质粒瞬时转染到MCF-7细胞中,可使Smad3在基因与蛋白水平的表达显著上调.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈洪生	哈尔滨医科大学附属第四医院肿瘤外科	18	68	5.0	7.0
2	刘明	哈尔滨医科大学附属第四医院肿瘤外科	65	347	11.0	15.0
3	白明瀚	哈尔滨医科大学附属第四医院肿瘤外科	3	5	1.0	2.0