人脑蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1基因克隆与原核表达

• 作者: 庞晓斌 李晓婷 杜冠华 谢欣梅 赵清辉
• 来源期刊: 河南大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: SHP-1 基因克隆 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 435-438
• 页数: 4页
• 分类号: Q986
• 字数: 2943字
• 语种: 中文

摘要

从人脑组织中提取mRNA,通过RT-PCR扩增出目标cDNA,构建蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1 pEASY-E1重组质粒.将重组质粒转化进E.coli TOP10感受态细胞中,筛选阳性克隆进行验证,将测序正确的质粒转化到E.coli Transetta感受态细胞中表达SHP-1.进一步对SHP-1表达的诱导温度和IPTG浓度等条件进行优化.结果显示,所克隆的SHP-1基因片断经PCR鉴定和测序分析,与目标基因完全相符.通过蛋白表达条件的优化,发现20℃,0.4 mmol/L IPTG对表达菌株进行诱导时,SHP-1可溶性蛋白表达量最大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜冠华	中国医学科学院北京协和医学院药物研究所国家药物筛选中心	258	3046	28.0	44.0
2	谢欣梅	河南大学药学院	27	136	7.0	11.0
3	庞晓斌	河南大学药学院	39	129	7.0	9.0
4	赵清辉	河南大学药学院	5	3	1.0	1.0
5	李晓婷	河南大学药学院	12	18	2.0	4.0