毕赤酵母表达人胰岛素前体的纯化和N末端不均一性分析

• 作者: 刘海峰 刘立岗 周祥山 庞甲佩 张元兴 胡永水
• 来源期刊: 华东理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 毕赤酵母 胰岛素前体 反相层析 MALDI-TOF-MS N末端测序
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 565-571
• 页数: 7页
• 分类号: Q815
• 字数: 4619字
• 语种: 中文

摘要

利用毕赤酵母生产人胰岛素前体时,在胰岛素前体的N末端引入一段由10个氨基酸组成的间隔肽(EEAEAEAEPK)虽然可以提高目的产物的表达量,但间隔肽中的多个酶切位点有可能造成目的产物N末端的不均一性.对毕赤酵母分泌表达的胰岛素前体蛋白进行分离纯化,得到的样品经过MALDI-TOF-MS和N末端测序,证实了胰岛素前体N末端不均一性的现象,并对产生不均一性的原因进行了分析.实验同时证实,利用毕赤酵母得到的胰岛素前体,经胰蛋白酶酶切后,生成了B链缺少第30位苏氨酸但N末端均一的胰岛素产物desB30,且C末端未发生降解,这为人胰岛素和地特胰岛素的制备提供了新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘海峰	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	139	2138	26.0	40.0
4	张元兴	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	126	951	16.0	24.0
5	周祥山	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	31	233	8.0	14.0
6	胡永水		7	10	2.0	2.0
13	庞甲佩		1	2	1.0	1.0
14	刘立岗		1	2	1.0	1.0