miRNA-126真核表达载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的抑制作用

• 作者: 廖珍媛 徐林 李永菊 田丹 秦娜琳 罗军敏 陈超
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-126 真核表达 乳腺癌 4T1细胞 增殖 迁移
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 295-300
• 分类号: R737.9|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2013.03.007

摘要

目的:构建miRNA-126的重组真核表达载体,研究其对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖和迁移的影响.方法:设计合成miRNA-126的正义和反义寡核苷酸,构建真核表达载体pcDNA6.2-miR-126,体外瞬时转染至4T1细胞,荧光显微镜下观测转染效率.Real-time PCR检测4T1细胞中miRNA-126的表达,MTT法和克隆形成实验检测4T1细胞的增殖和克隆形成能力,划痕法观察4T1细胞的体外迁移.结果:成功构建pcDNA6.2-miR-126真核表达载体,其可在4T1细胞中有效表达miR-126.与转染空质粒组(pcDNA6.2-Ctrl)相比,瞬时转染72 h后,pcDNA6.2-miR-126转染组4T1细胞的体外增殖能力受到明显抑制[(0.30±0.03) vs (0.51 ±0.04),P＜0.05]；瞬时转染48 h后,pcDNA6.2-miR-126组4T1细胞迁移能力也受到明显抑制[(8.17 ±2.30) vs (28.33 ±2.16)个,P＜0.05].结论:miRNA-126过表达可抑制乳腺癌4T1细胞的增殖及迁移.