沉默HerpUD1基因表达提高人肝L-02细胞对放射处理的敏感性

• 作者: 宋立华 张乃宁 张情 杨彦勇 马莉
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 HerpUD1基因 内质网膜蛋白 人肝L-02细胞 放射处理 增敏作用
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 272-277
• 分类号: R730.54|R730.55
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2013.03.003

摘要

目的:利用RNA干扰技术沉默人肝L-02细胞内可诱导的同型半胱氨酸内质网应激泛素样结构域1(homocysteine-inducible,endoplasmic reticulum stress-inducible,ubiquitin-like domain member 1,HerpUD1)基因表达,探讨其对人肝L-02细胞的辐射增敏作用.方法:根据HerpUD1基因序列设计shRNA片段,构建靶向HerpUD1基因的shRNA表达载体,稳定转染L-02细胞,采用real-time PCR和Western blotting检测转染后细胞中HerpUD1 mRNA及蛋白的表达.以8GyX射线照射转染后细胞,Hoechst荧光染色观察细胞的凋亡情况.结果:成功构建靶向HerpUD1的真核表达干扰载体,并建立稳定转染shHerpUD1的L-02细胞株.在稳定转染的L-02细胞中,shHerpUD1-1420干扰片段干扰效果最好,与pGPU6-NC组(阴性对照组)相比,shHerpUD1-1420组HerpUD1 mRNA表达显著下降[(0.15±0.05)vs(1.00±0.08),P＜0.05],其蛋白水平的表达也显著降低[(0.19±0.01)vs(1.62±0.08),P＜0.01].转染后细胞经8Gyx射线照射后24h,L-02-shHerpUD1-1420组细胞凋亡率显著高于L-02-NC组(阴性对照组)[(10.23±3.37)％vs(6.89±1.49)％,P＜0.01],而L-02-NC组与L-02-Neo组相比则无显著差异(P＞0.05).结论:HerpUD1基因表达沉默显著增加X射线辐射引起的L-02细胞凋亡,具有辐射增敏作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋立华	上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系	40	307	9.0	16.0
5	马莉	第二军医大学长征医院营养科	39	168	8.0	12.0
6	杨彦勇	第二军医大学海医系防原医学教研室	5	7	2.0	2.0
7	张乃宁	上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系	2	1	1.0	1.0
8	张情	上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系	2	0	0.0	0.0