溴苯腈对SH-SY5Y细胞毒性及NF-κB表达的影响

• 作者: 卿燕 杜清清 梁艳芳 石年 范攀 赵飞
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 溴苯腈 细胞毒性 NF-κB
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 166-171
• 页数: 6页
• 字数: 4500字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2013.03.002

摘要

目的 探讨溴苯腈对SH-SY5Y细胞毒性及NF-κB、IκBα表达的影响.方法 以10、50、100 μmol/L溴苯腈分别染毒SH-SY5Y细胞,阴性对照组(0μmol/L)为溶剂DMSO对照组,不含溴苯腈,其余处理均相同.染毒24和48 h后用倒置显微镜下观察细胞形态学变化；用噻唑蓝(MTT)法检测其细胞毒性；染毒12、24、48、72、96 h后用细胞计数法测定SH-SY5Y细胞增殖；染毒24 h后用蛋白免疫印迹(Western blot)法和免疫细胞化学法检测NF-κB的表达,蛋白免疫印迹法检测IκBα的表达.结果 与阴性对照组比较,染毒24和48 h后,50、100 μmol/L溴苯腈组的细胞增殖抑制率均增加,差异有统计学意义(P＜0.05)；与24h比较,染毒48 h 50、100 μmol/L组的细胞抑制率明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).生长曲线实验结果显示,染毒24 h时各组细胞数目开始出现差异,随着培养时间延长组间细胞数目的差异更加明显,差异有统计学意义(F=17.15,P＜0.05).与Oh比较,0μmol/L组48、72、96h时细胞数目开始增加明显,10、50 μmol/L组72、96 h时细胞数目开始增加明显,差异均有统计学意义(P＜0.05)；100μmol/L组在0～96 h生长曲线中细胞数目无明显变化.与阴性对照组比较,50、100 μmol/L组细胞倍增时间增加,即增殖速度减慢,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫细胞化学结果显示,随着染毒剂量的增加,胞质、胞核中的棕黄色加深,NF-κB表达增加,并且出现NF-κB人胞核增加的趋势.Westernblot法结果显示,与阴性对照组比较,100μmol/L组细胞胞核中NF-κB的表达增加,差异有统计学意义(P＜0.05).与阴性对照组比较,50、100 μmol/L染毒组总蛋白中IκBα的表达减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在本实验条件下,溴苯腈可抑制SH-SY5Y细胞的增殖,可能与NF-κB的激活相关.