小鼠Fyn及其多种突变体的载体构建和蛋白生物活性预测分析

• 作者: 安磊 张伟 胡新德 赵善廷 闫宇华 陈树林 黄映雪
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Fyn 载体构建 突变体 生物活性
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 635-641
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 4375字
• 语种: 中文

摘要

旨在构建小鼠Fyn及其多种突变体真核表达载体,预测突变后的蛋白质二级结构和功能改变.克隆小鼠大脑皮质的Fyn基因,构建克隆质粒pMD18-T-Fynwt,经测序验证后,以pMD18-T-Fynwt为模板,针对不同突变位点设计引物,构建不同突变体克隆质粒并验证,将Fyn不同的突变体克隆至真核表达载体pCAG-MCS,构建真核表达载体pCAG-MCS-Fyn**,将表达载体转染细胞进行检测,并对其进行生物信息学分析.测序结果显示pMD18-T-Fynwt核苷酸序列正确率100％,突变体完全达到预期设计；pCAG-MCS-Fyn**转染细胞后Fyn**表达量明显升高(P＜0.01).结果表明,Fyn突变体蛋白质的二级结构与野型相比有很大改变,可能影响其生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵善廷	西北农林科技大学动物医学院	30	43	4.0	5.0
2	陈树林	西北农林科技大学动物医学院	73	299	9.0	13.0
3	张伟	西北农林科技大学动物医学院	52	240	9.0	11.0
4	安磊	西北农林科技大学动物医学院	9	30	4.0	5.0
5	胡新德	西北农林科技大学动物医学院	6	7	1.0	2.0
6	黄映雪	西北农林科技大学动物医学院	2	2	1.0	1.0
7	闫宇华	西北农林科技大学动物医学院	1	1	1.0	1.0