单纯疱疹病毒1型糖蛋白D主要抗原表位区的表达、纯化及鉴定

• 作者: 刘宾 刘红 和骁 赵晓涛
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 单纯疱疹病毒1型 糖蛋白D 主要抗原表位区 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 350-355
• 页数: 6页
• 分类号: R446|R34
• 字数: 4306字
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定.方法 用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序列,构建原核表达载体pET-GST-gD MED；将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli) BL21(DE3) pLysS,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过GST·Bind纯化试剂盒对gDMED融合蛋白进行纯化；Western blot对gD MED融合蛋白的免疫活性进行分析.结果 HSV-1 gD在266～394区域富含抗原表位,人工合成了该区域的cDNA序列,并成功构建了原核表达载体pET-GST-gD MED；gD MED融合蛋白主要以可溶形式表达,分子质量约为45 ku,纯度能达95％；Western blot结果显示,gD MED融合蛋白能与感染HSV-1患者的血清发生特异结合.结论 成功表达和纯化了具有良好抗原性的HSV-1 gD MED融合蛋白,为HSV免疫诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘红	北京大学人民医院检验科	39	385	11.0	19.0
2	赵晓涛	北京大学人民医院检验科	26	149	7.0	11.0
3	和骁	北京大学人民医院检验科	3	6	2.0	2.0
4	刘宾	北京大学工学院生物医学工程系	4	6	2.0	2.0