白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶Sap2多克隆抗体的制备、纯化及鉴定

• 作者: 仇萌 李蕾 邹先彪
• 来源期刊: 中国感染控制杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白假丝酵母菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶 多克隆抗体 抗原 抗体
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 241-246
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 5502字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-9638.2013.04.001

摘要

目的 制备白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶Sap2多克隆抗体,并对其进行鉴定.方法 提取白假丝酵母菌基因组DNA为模板,经聚合酶链反应(PCR)获取SAP2目的基因;双酶切SAP2基因与原核表达载体pMAL-c2x(+),构建pMAL-c2x/SAP2重组质粒;在大肠埃希菌BL21 (DE3)感受态细胞中经IPTG诱导表达出可溶性的融合蛋白;用可溶性Sap2免疫小鼠制备抗血清,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗血清效价,亲和层析法纯化抗血清后,利用Western免疫印迹(Western Blot)检测抗体特异性.结果 该研究成功制备了抗Sap2多克隆抗体,抗体效价＞1∶51 200;Western Blot检测结果表明,该抗体可特异性识别Sap2蛋白.结论 纯化后的Sap2作为抗原免疫小鼠,有较好的抗原性和免疫原性,可成功制备多克隆抗体,并具有高特异性,为快速检测侵袭性白假丝酵母菌感染奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李蕾		28	253	5.0	15.0
2	仇萌		4	10	2.0	3.0
3	邹先彪		6	14	2.0	3.0