菜心cDNA-AFLP分析体系的优化与建立

• 作者: 王恒 肖旭峰 雷建军 黄敏
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 菜心 cDNA-AFLP 分析体系
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 园艺科学
• 页码范围: 296-300
• 页数: 5页
• 分类号: S634.5|Q943.2
• 字数: 3907字
• 语种: 中文

摘要

以菜心的顶端分生组织为试材,对影响菜心cDNA-AFLP体系的关键因子进行了探讨,以期建立适于菜心转录组差异表达的cDNA-AFLP分析体系.结果表明:Trizol法适用于菜心总RNA提取；SMART双链cDNA合成法效率较高,其中第二链cDNA合成的最佳循环数为24个；Taq I/Ase 1分步各酶切3h可使双链cDNA酶切完全；预扩增体系以模板稀释20倍,27个循环扩增效果较好,退火温度对扩增结果影响不大,但Mg2+对PCR扩增影响较大,经比较加入2.5 μL Mg2+ (25 mmoL/L)的预扩及选扩电泳的效果均最佳；预扩产物稀释20倍用于选择性扩增,其PAGE电泳可以获得丰富且重复性好的带型.cDNA-AFLP分析体系的优化与建立为菜心抽薹开花分子机理进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	雷建军	华南农业大学园艺学院	105	1038	19.0	25.0
2	肖旭峰	江西农业大学农学院	28	99	6.0	8.0
6	黄敏	江西农业大学林学院	36	250	8.0	14.0
7	王恒	江西农业大学农学院	2	5	2.0	2.0