肝片形吸虫重组谷胱甘肽-S-转移酶对SD大鼠的免疫原性分析

• 作者: 冉旭华 宋佰芬 李晓娟 王密 王春仁 苗艳 闻晓波 魏晓曼
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝片形吸虫 谷胱甘肽-S-转移酶 SD大鼠 免疫原性
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 46-48,53
• 分类号: R383.26
• 语种: 中文

摘要

目的 分析肝片形吸虫重组谷胱甘肽-S-转移酶(FhGST)对SD大鼠的免疫原性. 方法 将已构建重组原核表达质粒pET30a-FhGST转化大肠埃希菌BL21 (DE3)宿主菌,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,蛋白质印迹(Western blotting)分析其免疫反应性.20只SD大鼠随机均分为蛋白免疫组和佐剂对照组,蛋白免疫组以纯化的重组蛋白皮下注射免疫SD大鼠,抗原免疫剂量为200μg/(只·次),共免疫3次,每次间隔3周.佐剂对照组以PBS代替免疫抗原同法注射.免疫前、每次免疫后和末次免疫后3周、6周鼠尾采血,分离血清.利用间接ELISA法检测免疫大鼠血清IgG抗体水平的动态变化,噻唑兰法(MTT法)检测脾淋巴细胞增殖情况. 结果 经纯化获得重组FhGST蛋白,SDS-PAGE电泳结果显示,在相对分子质量Mr 31300处出现单一条带.Western blotting分析结果表明,纯化重组FhGST蛋白能识别自然感然肝片形吸虫的山羊阳性血清,在Mr 31 300处可见特异的免疫反应带.重组FhGST蛋白免疫SD大鼠后,可诱导产生特异性IgG抗体,在免疫后第9周,抗体效价达到顶峰(1∶89 144),且明显高于佐剂对照组(1∶1 000).重组蛋白能显著刺激大鼠脾细胞的生长和增殖. 结论 重组FhGST蛋白能诱导SD大鼠产生特异性免疫应答,具有良好的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王春仁	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	125	282	7.0	10.0
2	冉旭华	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	52	175	7.0	10.0
3	闻晓波	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	59	191	7.0	11.0
4	王密	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	10	79	4.0	8.0
5	宋佰芬	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	39	91	4.0	7.0
6	李晓娟	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	5	15	3.0	3.0
7	魏晓曼	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	6	17	3.0	3.0