猪弓形虫重组MIC3蛋白单克隆抗体的制备及其初步应用

• 作者: 刘冬霞 吴叙苏 王占伟 王海燕 白昀 纪燕 邵国青
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 岗地弓形虫 MIC3蛋白 单克隆抗体 胶体金
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1622-1628
• 页数: 7页
• 分类号: S852.7
• 字数: 6153字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.10.016

摘要

为获得针对猪弓形虫MIC3蛋白的单克隆抗体,为进一步研制免疫金标试纸条提供材料,作者以纯化的重组MIC3蛋白免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb).经ELISA筛选阳性克隆和亚克隆建株,体内诱生腹水法制备McAb,测定其亚类、效价,进行Western blot分析,并利用胶体金颗粒标记的McAb制备免疫金标试纸条.成功制备了2株稳定分泌抗MIC3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株B7和D3,2株McAb的免疫球蛋白亚类均为IgG2a,其ELISA腹水效价分别为1∶64万和1∶192万,Western blot结果表明,2株McAbs腹水均能分别与纯化的重组MIC3蛋白和猪弓形虫全虫蛋白中大小为56和38 ku左右的蛋白发生特异性反应;用纯化后McAb标记的胶体金颗粒制备的免疫金标试纸条可以检测到最低浓度为4×104 CFU·mL-1的弓形虫速殖子.本研究为猪弓形虫病的现场诊断提供了有效的方法,显示出很好的临床应用前景.