SMAP-29抗菌肽的原核表达、纯化及活性检测

• 作者: 段晨曦 郑秋实 陶凤云
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 抗菌肽 SMAP-29 原核表达 抗菌活性
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 144-148
• 语种: 中文

摘要

旨在利用基因工程技术表达出有活性的重组SMAP-29抗菌肽.根据大肠杆菌偏好的密码子优化smap-29基因序列,在目标肽序列N端添加肠激酶识别位点,C端添加终止密码子,化学合成基因序列,通过EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切位点连接到pET-28a(+)上构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白,Ni-NTA亲和层析纯化,肠激酶切割后释放出SMAP-29抗菌肽,检测其抗菌活性.结果显示,带有6×His标签及肠激酶识别位点的SMAP-29重组融合蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达,利用Ni-NTA亲和层析可获得纯化的融合蛋白,肠激酶切割后释放出的SMAP-29重组抗菌肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白念珠菌的最小抑菌浓度依次为10、20和40 μmol/L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶凤云	北京联合大学生物化学工程学院	22	239	10.0	15.0
2	郑秋实	北京联合大学生物化学工程学院	1	3	1.0	1.0
3	段晨曦	北京联合大学生物化学工程学院	1	3	1.0	1.0