结核分枝杆菌Mtb81蛋白的表达及应用研究

• 作者: 刘爱国 朱中元 杨倩 杨欣 王海波 肖劲逐 邱一帆 陈德 颜磊
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 Mtb81 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 5-7
• 分类号: R378.91+1
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆结核分枝杆菌Mtb81蛋白的编码基因Rv1837c,并在大肠杆菌中表达、纯化,获得重组蛋白Mtb81.方法 以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,PCR扩增Rv1837c基因序列,克隆入原核表达载体pET-28a,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌后用IPTG诱导表达,纯化表达产物,获得重组Mtb81.ELISA检测重组Mtb81蛋白的敏感性和特异性.结果 重组质粒pETRv1837c测序表明具有正确的编码序列,质粒构建成功,重组蛋白Mtb81在大肠杆菌中以包涵体和可溶性形式稳定表达.以Mtb81为抗原ELISA检测结核病患者血清抗体总敏感性为20.83％,特异性为95.83％.结论 结核分枝杆菌Mtb81重组蛋白能在大肠杆菌工程菌种成功表达,为进一步的应用研究奠定基础.