Neuritin毕赤酵母表达系统的构建及其对PC12细胞的影响

• 作者: 于娜 仙玲玲 张树军 狄建军 穆莎茉莉 赵臣 黄瑾
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: Neuritin pPIC9k 毕赤酵母表达系统 PC12细胞
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 148-152
• 语种: 中文

摘要

旨在构建Neuritin的毕赤酵母表达系统获得大量有活性的Neuritin蛋白,研究其神经生物学功能.PCR扩增编码neuritin基因cDNA序列,并纯化回收,通过酶切和连接插入穿梭载体pPIC9K中,转化大肠杆菌DH5α,neuritin-pPIC9k重组质粒经PCR与测序鉴定后,使用Sal Ⅰ酶切使其线性化,电击转化酵母菌GS115,经筛选与鉴定,成功构建了Neuritin的毕赤酵母表达系统.结果表明,使用甲醇诱导其表达,SDS-PAGE和Western blot分析得到11 kD的Neuritin蛋白,纯化的Neuritin蛋白加入PC12细胞培养液中,能促进其突起的生长.