不同方法制备大鼠肝脏脱细胞支架及其免疫原性研究

• 作者: 姜楠 季茹 曹阳 李伟民 王建锋 王德盛 窦科峰 韩炜
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 脱细胞肝支架 肝组织工程 细胞外基质 免疫原性
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 844-849
• 分类号: Q95-3|R318.14
• 语种: 中文

摘要

目的:肝脏脱细胞支架(decellularized liver bioscaffold,DLB)在组织工程研究中具有良好前景,但对DLB的免疫原性尚未见探讨.本研究利用不同方案制备大鼠DLB,检测支架成分和体内重塑反应,为制备出低免疫原性的DLB提供改进依据.方法:选取文献报道的三种方案(分别以SDS,Triton X-100和NP-40为主要洗脱成分),制备F344大鼠DLB,进行HE和Masson染色,检测DLB中DNA、氨基葡聚糖(GAG)以及羟脯氨酸(HYP)含量；再将DLB埋植于C57BL/6小鼠的背部皮下,于术后第3、7和14天取出后进行形态学观察和组织学评分.结果:三种方案均成功制备出符合脱细胞标准的大鼠DLB；形态学结果提示TritonX-100和NP-40方案较SDS方案能更好地保护肝脏超微结构；成分检测结果发现NP-40方案去除DNA的能力显著强于SDS和Triton X-100方案(P＜0.05),而对GAG含量的洗脱作用最弱(P＜0.05)；异种体内埋置实验提示NP-40方案制备的DLB引起的免疫反应强度明显弱于SDS和Triton X-100方案,体内重塑结局评分显著高于SDS和Triton X-100方案.结论:与SDS和TritonX-100方案相比,NP-40方案能更有效地去除肝脏DNA,较好地保留GAG,诱导移植受体对DLB的良性重塑反应,为进一步的体内研究提供更优化的支架.