MLPA技术在3种遗传性疾病基因诊断中的应用

• 作者: 余永国 傅启华 姚如恩 应大明 沈永年 王剑 耿娟 郑昭璟
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 关键词: 核酸扩增技术 脊髓性,肌萎缩 DiGeorge综合征 肾上腺皮质增生,先天性
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 136-141
• 页数: 6页
• 字数: 5079字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2013.02.010

摘要

目的 评估多重连接探针扩增技术(MLPA)在脊髓性肌肉萎缩症(SMA)、DiGeorge综合征和先天性肾上腺皮质增生症(CAH)基因诊断中的应用价值.方法 采集2010年2月至2011年2月期间,上海儿童医学中心门诊21例确诊为SMA、DiGeorge综合征和CAH患者及家系成员(3例SMA先证者和家系成员6人、DiGeorge综合征4例、CAH患者8例)外周血并抽提基因组DNA.通过探针和靶序列DNA杂交、连接、PCR扩增,产物经毛细管电泳分离及GeneMarker(R)分析软件收集分析数据,建立MLPA技术,检测SMA、DiGeorge综合征和CAH患者及携带者致病基因拷贝数,并通过传统PCR酶切法和染色体芯片分析技术验证部分MLPA检测结果.结果 用MLPA技术检测3个SMA家系3例先证者SMN1基因第7和8号外显子均为0拷贝(纯合缺失),其父母均为该区域杂合缺失携带者,用传统酶切分析SMN基因扩增产物证实MLPA结果准确可靠；4例DiGeorge综合征患者中,3例患者22ql l.2区域为0.5拷贝左右(杂合缺失),缺失基因均包含Tbx1等,用染色体芯片技术分析其中1例患者全基因组拷贝数变异为22q11.2区域的1.3 Mb缺失,结果与MLPA检出的拷贝数变异相符；8例CAH患者中,6例存在21-羟化酶的编码基因(CYP21A2)及相关基因C4B和CYP21A1P的不同程度杂合缺失.结论 MLPA技术作为传统检测拷贝数变异技术的补充,可有效提高相对定量检测SMA、DiGeorge综合征和CAH患者及携带者致病基因拷贝数变异.