慢病毒介导的敲低UBC9表达抑制ERβ类泛素化修饰水平

• 作者: 付洁 关鑫 刘婕 叶棋浓 张浩 徐小洁 李玮妮 程龙 陈立涵
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒属 UBC9 ERβ 类泛素化修饰 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 187-190
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 3900字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.03.007

摘要

目的 建立稳定敲低UBC9蛋白表达的293T细胞株,检测其对雌激素受体β(ERβ)类泛素化修饰水平的调节作用.方法 构建4条针对人UBC9基因的慢病毒短发夹RNA(shRNA)的干扰载体,将其与慢病毒包装辅助质粒共转染293T细胞后,收集病毒上清,感染293T细胞,经嘌呤霉素(puromycin)筛选后获得稳定表达慢病毒介导UBC9 shRNA的混合细胞集落,分别用实时(real-time) PCR和Western印迹方法检测UBC9的表达情况,瞬时转染方法检测UBC9表达水平对ERβ类泛素化修饰水平的影响.结果 建立了稳定敲低UBC9的293T细胞株,UBC9降低能够抑制ERβ类泛素化修饰水平.结论 UBC9在ERβ类泛素化修饰反应中发挥重要作用.