链霉素残留检测直接竞争ELISA法的建立

• 作者: 奚茜 张明洲 李沐洁 王唯芬 王旻子 陈宗伦 龚云飞
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 链霉素 残留 直接竞争ELISA 快速检测
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 124-131
• 语种: 中文

摘要

目的:在多克隆抗体的基础上研制1种用于检测牛奶、蜂蜜中链霉素残留量的直接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA).方法:以兔抗链霉素多抗为包被原,以链霉素-辣根过氧化物连接物为标记物,TMB为显色底物,建立了1种链霉素残留量检测的竞争性直接酶联免疫快速检测方法,并与高效液相色谱(HPLC)分析方法比较和验证.结果:用该检测方法分别检测牛奶、蜂蜜中的链霉素残留情况.结果表明,在0.5～40.5 ng/mL的浓度范围内标准曲线方程为y=-0.4341x+1.1786 (r=0.9708),半抑制率IC50为3.60 ng/mL,最低检测限IC10为0.43 ng/mL,平均批内与批间变异系数分别为5.78％与8.11％.在牛奶、蜂蜜样品中的检测限分别为2.7 ng/mL、2.8 ng/mL.在添加10.0～400.0 ng/mL范围内,平均回收率在97％～107％.除双氢链霉素外,与其他抗生素药物均无交叉反应.牛奶、蜂蜜样品采用ELISA和HPLC 2种检测方法的相关系数分别为0.99和0.97,说明本研究建立的ELISA方法与HPLC方法具有很好的相符性.结论:直接竞争ELISA法可以满足牛奶、蜂蜜中链霉素残留的检测要求.