苦瓜AFLP和SRAP的PCR反应体系优化及应用比较

• 作者: 冯诚诚 刘萌芽 琚茜茜 黄如葵 黄玉辉
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 苦瓜 AFLP SRAP 多态性 比较
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 195-199
• 页数: 5页
• 分类号: S642.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.2.195

摘要

[目的]优化苦瓜AFLP和SRAP的PCR反应体系,比较这两种分子标记在苦瓜应用中的优劣,为苦瓜突变体筛选提供参考.[方法]以8份苦瓜种质为材料,对AFLP和SRAP反应体系中各反应因素浓度进行筛选优化；分别选取5对条带清晰、重复性好的AFLP和SRAP弓物对8份苦瓜材料进行扩增,比较其多态性.[结果]在AFLP反应体系中,在0～10倍稀稀释范围内,以连接产物稀释5倍时反应效果较好；将预扩产物稀释30倍进行选择性扩增为宜.在SRAP反应体系中,Mg2+浓度为2.5 mmol/L、dNTP浓度为0.2 mmol/L时,反应效果较好.多态性分析结果显示,5对AFLP引物共扩增出145条带,多态性条带有18条,多态性比率为12.41％；5对SRAP引物扩增条带数为109条,其中多态性条带数有9条,多态性比率为8.25％.[结论]AFLP和SRAP两种分子标记技术均可以很好反映苦瓜种质资源的遗传多样性,但AFLP扩增产物的平均多态性高于SRAP,能够比较稳定地筛选出差异条带.