枯草芽孢杆菌NJ-18的质粒消解及其在小麦根部的定殖

• 作者: 余新燕 侯毅平 卢靖乐 周明国 王建新 陈长军
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: NJ-18 质粒消解 化学转化 GFP 定殖
• 年，卷（期）: 2013,（18）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 3776-3783
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.18.005

摘要

[目的]研究从土壤中分离出来的具有广谱抗菌活性的枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）菌株NJ-18与作物互作关系，并观察外源导入绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）基因的NJ-18菌株在小麦根部的定殖能力。[方法]首先使用十二烷基硫酸钠（SDS）消解NJ-18的质粒，然后采用化学法导入gfp分子标记，并采用激光共聚焦显微镜检测该标记菌株在小麦根部的定殖能力。[结果]获得了NJ-18的质粒消解菌株C136，并采用化学方法成功将外源基因导入野生型菌株NJ-18及其质粒消解菌株C136，C136的转化效率可达到3.42×105 cfu/μg质粒DNA，是NJ-18转化效率的10倍左右。对比NJ-18与C136的生物活性发现，C136能够保持原有的抑菌活性；但是C136的生长曲线第一峰值出现的时间滞后12 h，第一峰值被抑制了29.4%；NJ-18-GFP能够附着在病原菌菌体上，导致其菌丝呈现膨大、畸形等；接种7d后能够在小麦根部表皮和中柱稳定定殖。[结论]枯草芽孢杆菌NJ-18菌株的转化方法宜选用化学法；该菌株能够在小麦根部定殖。