阳离子脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒转染骨骼肌卫星细胞

• 作者: 任明明 冯钢 李敬来 许志锋 韩振
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织构建细胞学实验 骨骼肌卫星细胞 骨骼肌干细胞 绿色荧光蛋白 质粒 阳离子脂质体 转染
• 年，卷（期）: 2013,（46）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 8056-8061
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 5676字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.46.013

摘要

背景：骨骼肌卫星细胞是一种具有多向分化能力的全能干细胞，存在于骨骼肌间质中，对缺血、缺氧有一定的耐受力，是干细胞工程中重要来源细胞。<br>　　目的：为联合基因工程细胞心肌成形治疗初步探讨较为简便、经济的骨骼肌卫星细胞体外培养方法，建立一种简单、高效的转染骨骼肌卫星细胞的方法及探讨转染后基因表达的特点。<br>　　方法：分离、培养兔大腿骨骼肌卫星细胞，用CKK-8法测定其生长曲线。根据质粒和脂质体不同比例分组，用脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒(plasmid enhanced green fluorescent protein，pEGFP)转染骨骼肌卫星细胞。测定各组转染效率及目标基因表达特点。<br>　　结果与结论：成功分离培养骨骼肌卫星细胞及转染pEFGF。在合适的质粒和脂质体比例下，转染效率可达35%以上。目标蛋白在转染12 h内开始表达，48-72 h表达最强，1周后逐渐减弱，2周后仍可观察到其表达。阳离子脂质体可介导pEGFP高效转染骨骼肌卫星细胞，转染效率与质粒、脂质体比例密切相关，目标基因表达随时间改变。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任明明	北京大学深圳医院心血管外科	28	55	4.0	6.0
2	许志锋	北京大学深圳医院心血管外科	24	53	4.0	6.0
3	冯钢	北京大学深圳医院心血管外科	19	46	4.0	6.0
4	韩振	北京大学深圳医院心血管外科	21	44	4.0	5.0
5	李敬来	北京大学深圳医院心血管外科	19	23	3.0	3.0