人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白真核表达载体的构建和鉴定

• 作者: 何莹 王英翔 罗阳 胡川闽 陈安
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: 中性白细胞 载脂蛋白类 明胶酶类 逆转录聚合酶链反应 重组,遗传
• 年，卷（期）: 2013,（13）
• 所属期刊栏目: 基础实践研究论著
• 页码范围: 1633-1634,1637
• 页数: 3页
• 字数: 2000字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2013.13.001

摘要

目的 构建人NGAL重组蛋白真核表达载体并转染HEK293T细胞进行瞬间表达.方法 从人白细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增NGAL基因并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/HisA中构建真核重组表达质粒pcDNA3.1/His A-NGAL,经测序鉴定正确后用脂质体转染HEK293T细胞,用Western blot和ELISA方法鉴定表达产物.结果 获得长度597 bp的NGAL蛋白基因并构建pcDNA3.1/His A-NGAL真核表达载体,测序正确后转染,用Western blot和ELISA方法证实HEK293T细胞可以表达NGAL重组蛋白并分泌出胞.结论 成功构建人NGAL重组蛋白真核表达载体,转染HEK293T细胞表达出相应蛋白,为下一步的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗阳	第三军医大学西南医院检验科	78	884	15.0	27.0
2	陈安	第三军医大学临床生化教研室	33	411	7.0	20.0
3	胡川闽	第三军医大学临床生化教研室	56	209	7.0	11.0
4	何莹	中国人民解放军第323医院检验科	7	28	3.0	5.0