Dravet综合征患者c.1738C＞T突变体体外剪接分析

• 作者: 夏永仁 廖卫平 李文斌 汤斌 罗金杰
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: Dravet综合征 SCN1A 剪接
• 年，卷（期）: 2013,（13）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2089-2090
• 页数: 2页
• 字数: 1860字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2013.13.008

摘要

目的:选取本实验室筛查SCN1A突变的Dravet综合征患者,通过生物信息学方法分析其对剪接的影响,构建迷你基因进行体外剪接分析.方法:使用Human Splicing Finder数据库预测c.1738C＞T突变对剪接的潜在影响,通过PCR方法扩增SCN1A第10、11、12、13号外显子及两端部分内含子,克隆到pTARGET真核表达载体,构建pTARGET-EXON-10-11-12-13迷你基因,以野生型pTARGET-EXON-10-11-12-13为模板构建c.1738C＞T突变体.将野生型和c.1738C＞T突变体分别转染HEK293细胞,提取总RNA进行RT-PCR.结果:野生型与c.1738C＞T突变体RT-PCR产物大小都为591 bp.结论:c.1738C＞T突变不是通过对剪接的影响导致疾病发生.