密码子优化型鸭甲肝病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达

• 作者: 刘光清 孟春春 李传峰 梁瑞英 胡文 陈宗艳
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭甲肝病毒 VP1 重组杆状病毒 密码子优化
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 页码范围: 1-8
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5316字
• 语种: 中文

摘要

为了提高基因A型鸭甲肝病毒（Duck hepatitis A virus，DHAV）VP1基因在昆虫细胞中的表达水平,本研究根据昆虫细胞密码子偏爱性对野生型DHAV VP1（wtVP1）基因进行改造,合成了optiVP1基因，并利用Bac-to-Bac表达系统构建了重组杆状病毒rBacmid-wtVP1和rBacmid-optiVP1,分别转染对数生长期的sf9昆虫细胞表达VP1蛋白。转染72 h后，sf9细胞出现典型的细胞病变（cytopathic effect，CPE）, Western-blot和间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence assay，IFA）检测结果表明VP1蛋白在重组杆状病毒感染的sf9昆虫细胞中获得了良好表达。用Image J软件对Western-blot扫描的图片进行灰度分析发现， optiVP1基因在昆虫细胞中的表达水平明显高于wtVP1。本研究为进一步研制诊断抗原和新型基因工程疫苗的开发奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘光清	中国农业科学院上海兽医研究所	54	461	9.0	20.0
2	孟春春	中国农业科学院上海兽医研究所	21	62	5.0	6.0
3	李传峰	中国农业科学院上海兽医研究所	32	102	4.0	9.0
4	陈宗艳	中国农业科学院上海兽医研究所	28	91	4.0	8.0
5	梁瑞英	中国农业科学院上海兽医研究所	6	4	1.0	2.0
6	胡文	中国农业科学院上海兽医研究所	2	3	1.0	1.0