HIV-1 B亚型假病毒的制备与鉴定

• 作者: 孙丹丹 朱娜 朱羿龙 李昌 杜寿文 王茂鹏 金宁一
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1 B亚型假病毒 感染 鉴定方法
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 31-34
• 页数: 4页
• 分类号: R372
• 字数: 3733字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.01.009

摘要

目的：制备携带增强绿色荧光蛋白（ EGFP）基因和ENV包膜蛋白的HIV-1 B亚型假病毒用于感染研究，并建立可行的鉴定方法。方法双质粒共转染HEK293 T细胞后收获病毒上清， TRIzol法提取病毒基因组并采用RT-PCR进行报告基因扩增，Western印迹和ELISA法检测病毒P24抗原。假病毒感染HIV-1允许细胞，进行报告基因检测、病毒滴度测定以及单轮感染活性实验研究。结果与结论建立了HIV-1假病毒制备与鉴定方法，制备获得了B型HIV-1假病毒，经鉴定具备感染SupT1和TZM-bl细胞能力，为HIV-1与宿主细胞相互作用研究奠定了基础。