活化型及失活型SUMO1真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 侯筱宇 杜彩萍 段富刚 王梅
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: SUMO1 活化型 失活型 SUMO化 真核表达载体 表达
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: Q784|R743.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2014.05.0103-5

摘要

目的:构建活化型及失活型SUMO1(small ubiquitin-related modifier1)真核表达载体并鉴定其蛋白活性.方法:以野生型HA-SUMO1-pcDNA3.1为模板,采用PCR扩增目的基因,将其连接入克隆载体T vector,筛选阳性重组子;将目的基因酶切回收后亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1.将阳性克隆转染HEK293细胞,免疫印迹鉴定底物蛋白与SUMO1的结合情况(即SUMO化水平).结果:活化型及失活型SUMO1目的基因被扩增,并且亚克隆入pcDNA3.1,且测序结果与预期一致.免疫印迹分析显示,转染活化型SUMO1组检测到显著的蛋白SUMO化条带,而失活型组则无明显条带.结论:活化型及失活型SUMO1真核表达载体成功构建,并可于HEK293细胞高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯筱宇		24	97	5.0	9.0
2	杜彩萍		7	6	1.0	2.0
3	王梅		7	11	2.0	3.0
4	段富刚		1	0	0.0	0.0