柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的克隆、序列分析与原核表达

• 作者: 刘田 吕敏娜 吴彩艳 孙铭飞 廖申权 戚南山 李国清 李娟
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美耳球虫 葡萄糖-6-磷酸异构酶 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 页码范围: 72-77
• 页数: 6页
• 分类号: S852.723
• 字数: 4183字
• 语种: 中文

摘要

为研究柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）葡萄糖-6-磷酸异构酶（glucose-6-phosphate isomerase, G6-PI）的生化特性，本研究对其基因进行了克隆和原核表达。根据NCBI已公布的E. tenella Houghton株G6-PI的基因序列（GI：298161921）设计特异性引物，运用RT-PCR方法扩增EtG6-PI基因序列，并将其克隆到表达载体pColdI、pCold43a中，构建重组质粒pColdI-EtG6-PI、pCold43a-EtG6-PI，经测序鉴定正确后，将其转化感受态细胞E.coli Rosetta (DE3)，并进行IPTG诱导表达。结果表明， E. tenella G6-PI的ORF序列（1650 bp），编码550个氨基酸；重组菌pColdI-EtG6-PI、pCold43a-EtG6-PI均能成功诱导表达，其中pCold43a-EtG6-PI表达部分可溶性蛋白，表达产物纯化后可用于酶生化特性分析。柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的成功克隆表达为该酶的功能研究奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李国清	华南农业大学兽医学院	94	489	12.0	15.0
2	吕敏娜	广东省农业科学院动物卫生研究所	21	140	6.0	11.0
3	廖申权	广东省农业科学院动物卫生研究所	17	99	6.0	9.0
4	吴彩艳	广东省农业科学院动物卫生研究所	13	58	4.0	7.0
5	戚南山	广东省农业科学院动物卫生研究所	11	66	5.0	7.0
6	李娟	广东省农业科学院动物卫生研究所	6	14	2.0	3.0
7	刘田	华南农业大学兽医学院	2	2	1.0	1.0