小反刍兽疫病毒H基因DNA疫苗的构建及对小鼠的免疫原性

• 作者: 李刚 李文超 梁琳 王文泉 金红岩 隋修锟
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 DNA疫苗 H基因 免疫原性
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1142-1147
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4627字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.07.016

摘要

旨在构建表达小反刍兽疫病毒(PPRV)H蛋白的核酸疫苗,并评价其对小鼠的免疫原性.利用RT-PCR扩增了PPRV的H基因并将其克隆到pcDNA3.1(+)载体中,构建真核表达质粒pcDNA3.1-H,然后转染鸡胚成纤维(CEF)细胞,采用间接免疫荧光和Western blot检测H蛋白的瞬时表达情况.将重组质粒通过后腿肌肉注射的方式免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA、淋巴细胞增殖试验和细胞因子检测评价该DNA疫苗的免疫效果,结果表明,成功构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1-H,并且能够在CEF细胞中表达.免疫小鼠后,pcDNA3.1-H能够诱导小鼠产生较高的特异性抗体水平,DNA疫苗免疫组小鼠的脾淋巴细胞增殖试验刺激指数(SI)均高于空载体和PBS免疫组,并且能够分泌较高水平的IFN-γ和IL-4.因此,制备的DNA疫苗免疫小鼠后可诱导体液免疫应答和细胞免疫应答,具有较好的应用前景.