(木奈)叶片中烯脂酰-CoA还原酶基因PsECR的筛选及其启动子的克隆表达分析

• 作者: 吕恃衡 姜翠翠 潘东明 王玉珍 赵利 陈桂信
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: (木奈)(Prunus salicina Lindl.var.cordata J.Y.Zhang et al.) 全长cDNA 启动子 调控元件 基因表达分析 序列分析
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 种质资源·遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 574-582
• 页数: 9页
• 分类号: S661.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20140030

摘要

[目的]探讨ECR基因在调控蜡质形成过程中分子机制及其启动子的克隆和功能,为其抗病机理研究和基因表达调控模式研究奠定基础.[方法]从已构建好的(木奈)5个不同生长发育时期叶片的均一化全长cDNA文库中分离得到了一个烯脂酰-CoA还原酶(ECR)基因,命名为PsECR,然后,根据其序列设计引物,采用Genome Walking方法从(木奈)基因组DNA中分离获得(木奈)PsECR基因上游的启动子序列,命名为PsECRp.[结果]PsECR序列分析结果表明,该基因的cDNA全长为1 717bp,5'非翻译区长447 bp,3’非翻译区长337 bp,开放阅读框(ORF)为933bp,编码311个氨基酸.通过蛋白质序列对比发现PsECR与蔷薇科植物苹果的ECR蛋白质同源性达到93％,荧光定量PCR分析表明,PsECR在幼叶、老叶中的表达量相对其他3个时期明显最低,而叶芽、展开叶、成熟叶中表达量处于同一水平.将得到的PsECRp序列用在线软件plantcare和plant分析表明,该序列除含有启动基本元件,如TATA-Box、CAAT-Box外,还含有2个防御相关元件(MYB1LEPR)、2个抗病响应元件(BIHD10S)、1个病原菌应答元件(W-Box)、1个真菌诱导反应元件(Box-w1)、2个茉莉酸甲酯响应元件(CGTCA-motif)、1个响应逆境胁迫富TC的重复序列(TC-rich repeats)等响应元件.[结论]筛选得到了PsECR基因全长序列,对该基因在叶片的不同生长发育过程中的动态表达分析显示,PsECR基因可能参与叶片蜡质合成的调控.由获得的PsECRp启动子的序列分析表明,可以推测ECR在植物应答抵抗病原菌和逆境胁迫方面起着非常重要的作用.