藜芦碱对 HepG2细胞的毒性作用及其机制

• 作者: 刘苍龙 梁乾德 汤响林 王宇光 肖成荣 谭洪玲 马增春 高月
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 藜芦碱 HepG2细胞 毒性作用
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 391-397
• 页数: 7页
• 分类号: R285|R966
• 字数: 4551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2014.03.014

摘要

目的：研究藜芦碱对人肝癌HepG2的细胞毒作用及其诱导细胞凋亡的机制，为开发安全有效的临床用药提供依据。方法藜芦碱0．1～0．6 g·L-1作用于HepG2细胞24 h，CCK-8法检测细胞存活率并计算IC50值；藜芦碱0．1～0．5 g·L-1作用于HepG2细胞24 h，观察细胞形态变化，乳酸脱氢酶（LDH）释放实验检测细胞膜损伤；流式细胞仪检测活性氧（ROS）的生成量、线粒体膜电位的变化以及细胞凋亡的变化；实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因p53、Bax、细胞色素c、胱天蛋白酶9和胱天蛋白酶3 mRNA表达。结果藜芦碱0．1～0．6 g·L-1作用于HepG2细胞可以显著抑制细胞活性（P＜0．05，P＜0．01），IC50值为0．4 g·L-1，95％的可信限为0．2558～0．6965 g·L-1。藜芦碱0．1，0．2，0．3，0．4和0．5 g·L-1给药组，与正常对照组相比，LDH释放量显著升高（P＜0．05，P＜0．01），ROS 的生成量显著增大（P＜0．05，P＜0．01），线粒体膜电位显著降低（P＜0．05，P＜0．01），细胞凋亡率显著升高（P＜0．05，P＜0．01）。实时荧光定量PCR检测显示，凋亡相关基因p53、Bax、细胞色素c、胱天蛋白酶9和胱天蛋白酶3 mRNA表达升高（P＜0．05，P＜0．01）。结论藜芦碱具有潜在的细胞毒性，能抑制HepG2细胞增殖，损伤细胞膜和线粒体进而启动凋亡基因胱天蛋白酶9和胱天蛋白酶3 mRNA表达，这可能是其最终导致细胞凋亡的作用机制。