双芽巴贝斯虫RAP-1C基因的克隆表达及重组蛋白反应原性的研究

• 作者: 关贵全 刘军龙 卢海燕 孟庆玲 杨聪山 殷宏 罗建勋 袁利芹 赵帅阳
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 双芽巴贝斯虫 RAP-1C基因 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 页码范围: 823-828
• 页数: 6页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文

摘要

拟通过对双芽巴贝斯虫棒状体相关蛋白1(rhoptry-associated protein-1,RAP-1)羧基端进行研究,以期了解该蛋白的一些免疫学特性.利用生物信息学软件,对RAP-1进行抗原表位预测,并与其他重要的巴贝斯虫和泰勒虫相应基因序列进行比对,以筛选出抗原性和特异性均良好的基因片段;针对筛选出的基因片段设计引物,对该基因进行克隆和原核表达,最后利用Western-blot对重组蛋白的反应原性和特异性进行分析.结果显示,融合目的蛋白含His标签,分子质量为26 ku左右,该蛋白只与双芽巴贝斯虫阳性血清发生特异性反应,与其他主要巴贝斯虫、泰勒虫的阳性血清无交叉反应.结果表明,表达的PAP-1蛋白可作为ELISA诊断方法的候选抗原,为建立一种双芽巴贝斯虫病特异性的免疫学诊断方法奠定了基础.