双重荧光RT-PCR检测4种致病性亚型埃博拉病毒方法的建立

• 作者: 师永霞 方盛藩 李小波 苏锦坤 郑夔 钟玉清 黄吉城
• 来源期刊: 华南预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 埃博拉病毒 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 416-420
• 页数: 5页
• 分类号: R512.8|R185.3+5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13217/j.scjpm.2014.0416

摘要

目的 建立可同时检测苏丹、扎伊尔、本迪布焦和科特迪瓦4种致病性亚型埃博拉病毒的双重荧光RT-PCR检测方法.方法 根据4种致病性亚型埃博拉病毒的核蛋白NP基因保守序列,针对苏丹型/扎伊尔型病毒以及针对本迪布焦型/科特迪瓦型病毒,相应设计2套引物和探针.以体外转录的4种亚型埃博拉病毒RNA为模板,进行条件的优化以及方法特异性、灵敏度、重复性试验,建立双重荧光RT-PCR检测方法.结果 新建立的双重荧光RT-PCR方法检测只对4种埃博拉病毒阳性对照RNA模板有特异性扩增,与肾综合征出血热病毒、登革病毒、黄热病毒、西尼罗病毒、日本脑炎病毒、基孔肯雅病毒均无交叉反应,2套引物和探针的检测灵敏度均可达到最低50拷贝/μL.苏丹型和本迪布焦型埃博拉病毒阳性对照RNA模板的4种稀释度(2 × 108、2×106、2×104、2×102拷贝/μL)重复检测3次均有较好的重复性.结论 建立的方法能同时检测上述4种亚型埃博拉病毒,灵敏度高,特异性强,可用于埃博拉病毒疑似病例的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	师永霞		13	12	2.0	3.0
2	李小波		9	8	1.0	2.0
3	黄吉城		11	8	1.0	2.0
4	郑夔		12	8	1.0	2.0
5	钟玉清		2	14	1.0	2.0
6	苏锦坤		4	8	1.0	2.0
7	方盛藩		1	0	0.0	0.0