登革2型病毒NS3蛋白具有抑制病毒复制的作用

• 作者: 朱碧青 郑学礼
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 非结构蛋白NS3 真核表达
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 464-468
• 页数: 5页
• 分类号: R373
• 字数: 3742字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.05.007

摘要

目的 构建登革2型病毒非结构蛋白NS3及其结构域基因的真核表达载体,并鉴定重组蛋白在BHK-21细胞内对登革病毒复制的抑制作用.方法 以登革2型病毒新几内亚毒株(NGC DENV-2)基因组RNA为模板,设计引物扩增获得编码NS3及其蛋白酶NS3P和解旋酶NS3H的基因,通过基因重组的方法分别将3段基因片段克隆入真核表达载体pcD-NA3.1(+),获得重组表达载体pcDNA3.1-NS3、pcDNA3.1-NS3P和pcDNA3.1-NS3H;经脂质体法分别转染BHK-21细胞后,用RT-PCR、间接免疫荧光和Western印迹鉴定表达的蛋白.结果 成功构建pcNS3、pcNS3P和pcNS3H重组质粒,转染进BHK-21细胞48 h后,分别检测出相对分子量约为69 kDa、50 kDa及18 kDa的特异蛋白;且转染pcNS3、pcNS3H组均与空白对照组及未转染组间的病毒载量存在着差异(P＜0.05);转染pcNS3P组与未转染组及空白对照组的病毒载量无统计学差异(P＞0.05).结论 DENV-2的非结构蛋白NS3能够抑制病毒的复制.