副猪嗜血杆菌单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定

• 作者: 姜福成 张雪云 李曦 杨玉菊 柴政 王卓 王香玲 符芳 郑楠
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 ABCT OppA 病原学诊断
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 400-403
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61
• 字数: 2441字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2014.05.16

摘要

为筛选具有临床诊断价值的副猪嗜血杆菌(H.parasuis)单克隆抗体(MAb),本研究采用H.parasuis 5型强毒株(HPS-5)免疫BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术制备了一株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株.Western blot结果表明该MAb能够特异性识别所有H.parasuis标准菌株;免疫共沉淀技术与蛋白质谱分析显示该MAb所识别的蛋白为ATP结合盒转运蛋白(ABCT)家族的寡肽透过酶(OppA);利用MAb对噬菌体12肽库进行淘选,8个阳性噬菌体克隆展示有“KTPAE-R”保守序列,对应于H.parasuis SH29755株和SH0165株的469位～475位的氨基酸残基.对OppA氨基酸序列比对结果表明H.parasuis与其它10种猪常见细菌病病原序列一致性为9.1％～74.5％,本研究结果为进一步研究H.parasuis感染的病原学诊断建立了良好的基础.