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摘要:
目的:克隆表达肺炎支原体黏附蛋白P30,为临床诊断试剂和疫苗研制打下基础。方法:采用大肠杆菌优势密码子设计P30蛋白优化基因序列,采用Genscript软件评价设计基因的密码子适应指数(CAI),并利用载体pBVIL1实现P30优势表位基因在大肠杆菌中的表达,采用ELISA法对纯化的P30抗原活性进行测定。结果:野生P30基因的CAI为0.59,优化P30基因的CAI为0.84;在大肠杆菌中表达的IL1-P30融合蛋白的相对分子质量为43.5×103,纯化后的重组抗原能与肺炎支原体感染者血清发生特异性免疫反应,灵敏度和特异性分别为82.35%和89.36%,ROC曲线下面积为0.9088。结论:采用密码子优化技术实现了肺炎支原体黏附蛋白P30在大肠杆菌中的高效表达,获得的重组P30蛋白具有很好的抗原性,可用于肺炎支原体诊断试剂的研究。
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文献信息
篇名 肺炎支原体黏附蛋白P30的高效表达及初步应用
来源期刊 生物技术通讯 学科 生物学
关键词 肺炎支原体 P30黏附蛋白 优势密码子 原核表达
年,卷(期) 2014,(6) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 821-823
页数 3页 分类号 Q78
字数 2191字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.06.016
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张贺秋 军事医学科学院基础医学研究所 79 374 10.0 16.0
2 修冰水 军事医学科学院基础医学研究所 31 64 4.0 6.0
3 李鹏飞 军事医学科学院基础医学研究所 5 5 2.0 2.0
4 王成红 烟台市烟台山医院检验科 9 20 3.0 4.0
5 于传亭 烟台市烟台山医院检验科 9 58 3.0 7.0
6 张奇舒 军事医学科学院基础医学研究所 3 8 2.0 2.0
7 王晓丹 军事医学科学院基础医学研究所 1 3 1.0 1.0
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肺炎支原体
P30黏附蛋白
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原核表达
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生物技术通讯
双月刊
1009-0002
11-4226/Q
16开
北京丰台东大街20号
82-196
1989
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