乙型肝炎病毒x基因转染HepG2细胞后差异表达基因的筛选

• 作者: 吴玉章 吴胜昔 朱广倍 费蕾 陈永文
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒x基因 转染 HepG2细胞 基因芯片
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 787-791
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20140172

摘要

目的 建立稳定表达HBx蛋白的HepG2细胞系,利用基因芯片技术分析HBx转染肝癌细胞株引起的表达谱变化.方法 首先PCR扩增HBx基因片段,与真核表达载体pcDNA3.1(+)构建重组子,脂质体转染HepG2细胞经抗生素G418筛选后获得稳定表达HBx蛋白的HepG2细胞系,采用流式细胞术、Western blot鉴定HBx蛋白在细胞中的表达.利用基因芯片技术分析HBx转染肝癌细胞株引起的表达谱变化.结果 经HindⅢ和Xba Ⅰ内切酶酶切和测序鉴定表明成功构建了HBx基因真核表达载体,流式细胞术、Westem blot均证实HBx蛋白在HepG2细胞高效表达,基因芯片结果显示在检测的35 000个基因中有98个基因转录显著上调,24个基因转录显著下调.结论 成功构建了稳定、高效表达HBx的HepG2细胞,HBx转染HepG2细胞可导致部分基因显著差异表达,差异表达的基因可能参与了肝癌的发生发展.