双重PCR检测禽源生物制品中禽网状内皮组织增生症病毒和禽白血病病毒

• 作者: 吕素芳 庄金秋 毕研丽 沈志强 王金良 苗立中 郭广君
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 禽网状内皮组织增生症病毒 禽白血病病毒 PCR 检测
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 74-78
• 页数: 5页
• 分类号: S873
• 字数: 4075字
• 语种: 中文

摘要

为了快速、准确检测禽源生物制品中的禽网状内皮组织增生症病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV),根据GenBank中登录的REV参考毒株LTR基因序列和ALVP27基因序列,设计合成2对特异性引物.在建立各病毒单项PCR检测技术的基础上,优化反应条件,建立2种病毒的双重PCR检测方法.结果:可同时扩增REV的467 bp和ALV的675 bp的特异性片段,而对其他5种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性.敏感性测定结果表明,该双重PCR技术能检出10 pg的ALV和10 pg的REV模板.用双重PCR技术与REV的间接免疫荧光法及ALV EUSA对245份疫苗株检测,进行同步比较,结果总符合率为100％.表明建立的双重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,对这2种外源病毒的同时检测,显示出了较好的可行性.