小麦秆锈菌RAPD扩增体系的正交优化

• 作者: 曹远银 李天亚 陈思 陈靓
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦秆锈菌 RAPD 扩增体系 正交试验设计
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 339-342
• 页数: 4页
• 分类号: S223.2
• 字数: 2839字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2014.03.017

摘要

针对RAPD扩增技术在小麦秆锈菌遗传多样性的分析研究中重复性较低的不足,对小麦秆锈菌RAPD扩增体系进行优化.以小麦秆锈菌不同的生理小种为材料,采用L16(45)正交试验设计,考察模板DNA、Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTPs和随机引物浓度5个因素的影响,并对退火温度和循环次数进行优化.结果表明:小麦秆锈菌RAPD扩增的较优体系为25μL体系中含1×Buffer,40ng·μL-1模板DNA,1.5mmol· L-1 Mg2+,2.0U TaqDNA聚合酶,0.25mmol·L-1 dNTPs,0.40μmol· L-1随机引物;适宜的退火温度为36℃,适宜的循环次数为43次.该反应体系检测多态性能力强、反应系统稳定且重复性好,可以较好地应用于小麦秆锈菌的遗传多样性分析研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹远银	沈阳农业大学植物免疫研究所	109	928	17.0	23.0
2	李天亚	沈阳农业大学植物免疫研究所	19	45	5.0	6.0
3	陈思	沈阳农业大学植物免疫研究所	23	87	5.0	8.0