小麦条锈菌AFLP体系的优化

• 作者: 康晓慧 张妍
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦条锈菌 AFLP 反应体系 引物
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 2227-2228
• 页数: 2页
• 分类号: S435.121.4
• 字数: 2088字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.06.033

摘要

[目的]优化小麦条锈菌AFLP体系.[方法]以小麦条锈菌大田混合菌系为材料,采用改良CTAB法提取DNA,探索酶切、PCR过程,优化小麦条锈菌AFLP体系,并从64对引物中筛选出稳定、高效的引物组合.[结果]改良CTAB法有较好的破壁效果,所提DNA纯度高,条带清楚,无污染,适合AFLP操作.酶切3.0、3.5 h的效果相同,扩出的片断在100～2 000 bp,可进行预扩.Taq DNA聚合酶为0.5 U时,电泳图中出现了较亮的条带,片断大小在100～2 000 bp.16对引物组合可以扩增出较稳定的条带.[结论]优化的小麦条锈菌AFLP体系为:25.0 μl酶切体系,37 ℃酶切3.0 h,10.0 μl连接体系在22 ℃条件下连接过夜,连接产物、预扩产物分别按1:10、1:30的比例用ddH2O稀释后用于预扩和选择性扩增.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	康晓慧	西南科技大学生命科学与工程学院	77	303	9.0	12.0
2	张妍	西南科技大学生命科学与工程学院	1	5	1.0	1.0