白喉毒素无毒突变体CRM197基因的克隆与表达

• 作者: 周宇 李春阳 李晓容 袁涛 赵兆
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 白喉毒素 CRM197 克隆 表达 载体蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2948字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2014.03.004

摘要

目的：构建白喉毒素(Diphtheria toxin)无毒突变体CRM197(Cross-reacting materials 197)的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达重组蛋白。方法以白喉杆菌(ATCC39255)基因组DNA为模版,采用聚合酶链式反应(Poly-merase chain reaction, PCR)扩增 CRM197基因,插入表达载体 pET11b 中,构建重组原核表达质粒 pET11b-CRM197。经双酶切及测序鉴定正确后,重组质粒被转化入大肠杆菌Rosetta 2(DE3) pLysS, IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定,结果表明与预期一致；表达的重组蛋白相对分子质量约58000,并可与鼠抗CRM197单克隆抗体特异性结合。结论已成功构建了重组原核表达载体pET11b-CRM197,重组的CRM197蛋白在大肠杆菌中得到了表达,为以该重组突变体作蛋白载体制备结合疫苗奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周宇		3	4	2.0	2.0
2	袁涛		7	17	2.0	3.0
3	李春阳		7	12	2.0	3.0
4	赵兆		3	2	1.0	1.0
5	李晓容		1	2	1.0	1.0