山羊鼻内肿瘤病毒RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘丹 刘杰 廖红 杨绍林 舒蕾 谢智勇 郝中香 郭玲 颜其贵
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 鼻内肿瘤病毒 RT-PCR 检测
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 页码范围: 933-938
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.3
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中登录的山羊鼻内肿瘤病毒(ENTV) SC株的基因序列,设计合成了1对特异性引物,通过对反应条件进行优化,建立了一种快速检测ENTV的RT-PCR方法.结果显示,以该引物进行RT-PCR扩增,能得到与理论设计值大小相符的323 bp的特异性条带;与ENTV-SC株相应序列的同源性达98％;该方法最低可检测出6 pg的ENTV;用此方法对健康山羊鼻黏膜上皮、健康牛鼻黏膜上皮、绵羊肺腺瘤病毒、肺炎球菌和大肠杆菌的扩增结果均为阴性,重复性和稳定性好;对随机收集的100份山羊样品进行检测,并与临床诊断结果进行比较,符合率为100％.结果表明,此方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性均好,可用于山羊鼻内肿瘤病毒的临床检测和试验研究.