猪圆环病毒1型real-time PCR检测方法的建立

• 作者: 于红欣 周双海 孟凡伟 王俊 王立娇
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒1型 SYBR GreenⅠ real-time PCR 定量检测
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 页码范围: 1036-1041
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.2
• 语种: 中文

摘要

为了建立一种定量检测猪圆环病毒1型(PCV1)的实时荧光定量PCR方法,根据PCV1基因序列设计了1对特异性引物,并构建含有PCV1基因片段的重组质粒,以系列稀释后的重组质粒作为模板建立了定量检测PCV1的SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法,并绘制标准曲线,进行特异性、敏感性和重复性试验.结果显示,该方法的标准曲线的决定系数为0.999,显示出优良的线性关系;最低可准确检测320copies/μL的核酸模板,重复性试验的变异系数小于2％;该方法对PCV2、猪细小病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪瘟病毒等的检测结果均为阴性;对临床样品的检出率高于常规PCR方法.结果表明,建立的real-time PCR特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于PCV1的检测与定量分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周双海		59	192	8.0	10.0
2	于红欣		15	38	3.0	6.0
3	王立娇		4	13	2.0	3.0
4	孟凡伟		10	34	4.0	5.0
5	王俊		9	19	3.0	4.0